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301-93531 Phos-tag(TM) Biotin Phos-tag *

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Phos-tag * Phos-tag Biotin 用于磷酸化蛋白質的免疫印跡分析,使用*標記的Phos-tag 進行化學發光檢測。Phos-tag BTL-104和BTL-105為PVDF膜上的磷酸化蛋白檢測提供了一種敏感的方法。該方法需要用到鏈霉親和素標記的辣根(HRP)和化學法官檢測試劑。貨號:301-93531 BTL-104;308-93541 BTL-105;308-9720

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Phos-tag * Phos-tag Biotin

磷酸化蛋白質的免疫印跡分析
- 使用*標記的Phos-tag 進行化學發光檢測

Phos-tag BTL-104和BTL-105為PVDF膜上的磷酸化蛋白檢測提供了一種敏感的方法。該方法需要用到鏈霉親和素標記的辣根(HRP)和化學法官檢測試劑。

Phos-tag Biotin
Phos-tag(TM) Biotin BTL-104的化學結構

Phos-tag(TM) Biotin BTL-105的化學結構

Phos-tag(TM) Biotin BTL-111的化學結構

Phos-tag*用于免疫印跡分析的原理

Phos-tag*用于免疫印跡分析的原理

Phos-tag Biotin的特點:

■ 對磷酸化蛋白的檢測極其靈敏 Phos-tag特異性結合與氨基酸基序列無關 
■ 可適用于下游的抗體探針和質譜分析等
■ 操作過程與常規使用辣根標記抗體檢測近似

Phos-tag™ Biotin應用

(一)在PVDF 膜上檢測磷酸化蛋白

可精確檢測轉印在PVDF膜上的磷酸化蛋白至ng級水平,未檢測到相應的去磷酸化蛋白與非磷酸化蛋白的斑點。

免疫印跡檢測磷酸化蛋白——Phos-tag™ *。

摘自Eiji Kinoshita ,et al., Mol.Cel.Proteomics (2006) 5: 749

Phos-tag™ Biotin使用注意事項

1. 在10μL溶劑E的Phos-tag BTL相對于1μL溶劑G的鏈霉親和素標記辣根氧化酶而言,大大地過量。使用更小量 Phos-tag BTL (例如1μL 溶劑E) 和溶劑 G (1μL) 得到同樣的結果. 用戶可以調整溶劑E的體積以獲得同樣的靈敏度或者節省經費。如果溶劑E的體積減少,不需要調整zinc(II) 溶液的量(溶劑 F)。 按規范使用買了的磷酸化蛋白和鏈霉親和素標記辣根氧化酶(GE Healthcare Bio-Sciences),可以觀測到BTL-104和BTL-105在檢測效率上存在細微差別(由于間隔效應)。

2. 如果膜沒有在溶劑C中*浸潤,背景信號就會升高并形成斑點。更嚴重的是,無法觀測到蛋白質信號。請確認膜不會排斥溶劑C。

3. 強烈建議使用PVDF膜用于Phos-tag™ BTL方法。

Phos-tag瓊脂糖 Phos-tag Agarose 相關產品 

貨號

廠商編號

產品名稱

規格

301-93531

BTL-104

Phos-tag Biotin BTL-104 Phos-tag *

10 mg

308-93541

BTL-105

Phos-tag Biotin BTL-105 Phos-tag *

10 mg

308-97201

BTL-111S1

Phos-tag™ Biotin BTL-111 1 mM Aqueous Solution
Phos-tag™ * BTL-111 1 mM水溶液

0.1 ml

考慮到更佳的溶解度,**次使用時,試用Phos-tag Biotin BTL-104。
可以觀測到BTL-104和BTL-105在檢測效率上存在細微差別(由于間隔效應)。
BTL-111S1擁有更長的親水性間隔, 因此比BTL-104有更高的靈敏度。

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