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濾光片在流式細(xì)胞儀中應(yīng)用

來源:北京先鋒泰坦科技有限公司   2024年05月23日 10:25  

濾光片在流式細(xì)胞儀中應(yīng)用

 

流式細(xì)胞儀是測量染色細(xì)胞標(biāo)記物熒光強(qiáng)度的細(xì)胞分析儀,是在單個(gè)細(xì)胞分析和分選基礎(chǔ)上發(fā)展起來的對(duì)細(xì)胞的物理或化學(xué)性質(zhì)(如大小、內(nèi)部結(jié)構(gòu)、DNA、RNA、蛋白質(zhì)、抗原等)進(jìn)行快速測量并可分類收集的高技術(shù)儀器。

 

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流動(dòng)細(xì)胞儀主要有以下五部分構(gòu)成:

1.                      流動(dòng)室及液流系統(tǒng)

2.                      激光源及光學(xué)系統(tǒng)

3.                      光電管和檢測系統(tǒng)

4.                      計(jì)算機(jī)和分析系統(tǒng)

 

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流動(dòng)室及液流系統(tǒng)

流動(dòng)室由樣品管、鞘液管和噴嘴等組成,常用光學(xué)玻璃、石英等透明、穩(wěn)定的材料制作。樣品管貯放樣品,單個(gè)細(xì)胞懸液在液流壓力作用下從樣品管射出;鞘液由鞘液管從四周流向噴孔,包圍在樣品外周后從噴嘴射出。為了保證液流是穩(wěn)液,一般限制液流速度υ<10m/s。

 

激光源及光學(xué)系統(tǒng)

經(jīng)特異熒光染色的細(xì)胞需要合適的光源照射激發(fā)才能發(fā)出熒光供收集檢測。常用的光源有弧光燈和激光;激光器又以氬離子激光器為普遍,也有配和氪離子激光器或染料激光器。

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在激光光源和流動(dòng)室之間有兩個(gè)圓柱形透鏡,將激光光源發(fā)出的橫截面為圓形的激光光束聚焦成和細(xì)胞的直徑相近,在這種橢圓形激光光斑內(nèi)激光能量成正態(tài)分布,使通過激光檢測區(qū)的細(xì)胞受照強(qiáng)度一致。而光學(xué)系統(tǒng)則是由若干組透鏡、小孔、濾光片組成,主要作用是將不同波長的熒光信號(hào)送到不同的光電倍增管。

 

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光電管和檢測系統(tǒng)

經(jīng)熒光染色的細(xì)胞受合適的光激發(fā)后所產(chǎn)生的熒光是通過光電轉(zhuǎn)換器轉(zhuǎn)變成電信號(hào)而進(jìn)行測量的。光電倍增管(PMT)最為常用。PMT的響應(yīng)時(shí)間短,僅為ns數(shù)量級(jí);光譜響應(yīng)特性好,在200~900nm的光譜區(qū),光量子產(chǎn)額都比較高。也有用硅光電二極管的,它在強(qiáng)光下穩(wěn)定性比PMT好。

 

計(jì)算機(jī)和分析系統(tǒng)

經(jīng)放大后的電信號(hào)被送往計(jì)算機(jī)分析器。多道的道數(shù)是和電信號(hào)的脈沖高度相對(duì)應(yīng)的,也是和光信號(hào)的強(qiáng)弱相關(guān)的。對(duì)應(yīng)道數(shù)年縱坐標(biāo)通常代表發(fā)出該信號(hào)的細(xì)胞相對(duì)數(shù)目。多道分析器出來的信號(hào)再經(jīng)模-數(shù)轉(zhuǎn)換器輸往微機(jī)處理器編成數(shù)據(jù)文件

 

流式細(xì)胞儀主要用到三類濾光片:

1:長波通濾光片(LPF)--只允許特定波長以上的光線通過;

2:短波通濾光片(SPF)--只允許特定波長以下的光線通過;

3:帶通濾光片(BPF)--只允許特定波長的光線通過

 

我司能提供的濾光片產(chǎn)品有熒光濾光片、窄帶濾光片、帶通濾光片、生化分析濾光片、長波通濾光片、短波通濾光片等,產(chǎn)品主要應(yīng)用于醫(yī)療、生化等領(lǐng)域。歡迎您來選購!

 

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常用熒光濾光片組合

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常用窄帶濾光片產(chǎn)品

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常用生化濾光片

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常用長波通濾光片

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常用短波通濾光片

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