氧化磷酸化系列/三磷酸腺苷測試盒/微量法是上海酶聯生物為您精心研發用于實驗方法的生化試劑盒產品，也是您科研路上的好幫手，產品說明資料歡迎您來電索取。

氧化磷酸化系列/三磷酸腺苷測試盒/微量法

產品規格 :100管/48樣

測試方法：微量法

產品分類：氧化磷酸化系列

產品品牌：mlBio/酶聯生物

產品包裝：液體盒裝

運輸條件：快遞包郵

應用范圍：僅供科研研究使用

保存條件：低溫避光保存

有效期：６個月

說明書 : 咨詢或電詢客服索取

供應商：上海酶聯生物科技有限公司

注    意：正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。

氧化磷酸化系列/三磷酸腺苷測試盒/微量法

測定意義：

線粒體復合體Ⅴ又稱F1F0-ATP合酶，廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞的線粒體中，由F1和F0兩個亞單位組成。該酶利用呼吸鏈產生的質子電化學梯度催化ATP合成，也可逆過程水解ATP。此外，復合體Ⅴ還存在于葉綠體、異養菌和光合細菌中。復合體Ⅴ是線粒體氧化磷酸化和葉綠體光合磷酸化合成ATP的關鍵酶。

測定原理：

復合體Ⅴ水解ATP產生ADP和Pi，通過測定Pi增加速率來測定復合體Ⅴ活性。

需自備的儀器和用品：

可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

樣本的前處理：

組織、細菌或細胞中胞漿蛋白與線粒體蛋白的分離：

①準確稱取0.1g組織或收集500萬細胞，加入1mL試劑一和10uL 試劑三，用冰浴勻漿器或研缽勻漿。

②將勻漿600g，4℃離心5min。

③棄沉淀，將上清液移至另一離心管中，11000g，4℃離心10min。

④上清液即為除去線粒體的胞漿蛋白，可用于測定從線粒體泄漏的復合體Ⅴ（此步可選做）。

⑤步驟④中的沉淀即為線粒體，加入800uL試劑二和8uL 試劑三，超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10秒，重復30次），用于復合體Ⅴ酶活性測定。