DMEM是現今細胞培養中比較常見的培養基之一,dmem培養基是建立在MEM培養基的基礎上研究出來的,它與MEM培養基相比較,DMEM培養基中加大了MEM培養基中各種成分的用量,下文主要介紹一下自己配制DMEM的方法。
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DMEM是現今細胞培養中比較常見的培養基之一,dmem培養基是建立在MEM培養基的基礎上研究出來的,它與MEM培養基相比較,DMEM培養基中加大了MEM培養基中各種成分的用量,下文主要介紹一下自己配制DMEM的方法。
1 制備新鮮三蒸水或Millipore超純水。
2 稱取所需量的干粉培養基,加入約終體積一半的三蒸水中;若配制一個包裝的培養液,在將整個包裝的干粉倒入三蒸水后,需用水洗包裝袋內面2次,倒入培養液中,以保證所有干粉都溶解成培養液。磁力攪拌或人工攪拌使之*溶解。
3 根據包裝袋上的要求補加所需量的*;根據實驗需要,添HEPES(5-20mmol/L)、*和其他特殊物質。
4 加水定容到終體積。
5 必要時用1 mol/L 鹽酸和1 mol/L 氫氧化鈉調節pH。
6 用無菌0.22um濾膜過濾除菌,分裝于無菌血清瓶中,4℃冰箱保存。
配制好的培養液用前加入100U/mL*和100U/mL*,并根據需要加入血清(5%-20%)。 DMEM培養基應用廣泛?;贒MEM培養基中氨基酸、微生物含量豐富,并具有糖酵解中的丙酮酸和微量Fe離子,因此在細胞培養、疫苗生產等方面的應用常見。
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