午夜福利视频-国产国拍亚洲精品AV在线-少妇人妻综合久久中文字幕-哔哩哔哩漫画破解版永久免费

1 實驗部分

1． 1 儀器與試劑

Agilent 1220 液相色譜儀，配自動進樣器，Agilent G1315B 二極管陣列檢測器( 美國Agilent公司) ; RE-2000 型旋轉蒸發器; KQ-5200 型超聲波清洗儀; TGL-16M 型高速臺式冷凍離心機; Milli-Q 去離子水發生器( 美國Milli-Q 公司) 。乙腈( 色譜純) ; 甲酸、乙酸銨、三乙胺、冰醋酸( 分析純) ; C12-BAC、C14-BAC、C16-BAC( 純度≥99%，美國Sigma 公司) 。樣品: 本單位檢驗樣品。

1． 2 標準貯備溶液、工作溶液及緩沖溶液的配制

分別準確稱取C12-BAC、C14-BAC、C16-BAC 標準品各0. 1 g，至0. 000 1 g，用20%甲醇水溶液配成10 g /L 的標準儲備液，該溶液在4 ℃下保存。取適量的上述3 種標準儲備液，用含0. 5% 甲酸的甲醇配成分別為5. 0、25、100. 0、500. 0、1 000. 0、3 000. 0 mg /L的混合標準工作溶液。乙酸銨緩沖溶液: 稱取3. 08 g 乙酸銨置于燒杯中，加水溶解并定容至1 000 mL，加1 mL 三乙胺，用冰醋酸調節pH 至4. 0，過0. 45 μm 濾膜，待用。

1． 3 樣品處理方法

1． 3． 1 護發素等膏霜類樣品

稱取0. 5 g 樣品，至0. 01 g，置于25 mL 比色管中，加入20 mL 含0. 5% 甲酸的甲醇超聲波提取20 min，然后加入0．2 g 氯化鈉，用含0. 5% 甲酸的甲醇定容至刻度，經濾紙過濾，吸取15 mL 濾液至100 mL 蒸發瓶內，并將其接至旋轉器上，于45℃水浴中減壓蒸餾至干，然后準確用3 mL 含0. 5%甲酸的甲醇溶解，經濾紙過濾，過0. 45 μm 濾膜，濾液供HPLC 分析。

1． 3． 2 洗發水等液態樣品

稱取1. 0 g 樣品，至0. 01 g，置于10 mL 容量瓶中，加入9 mL 含0. 5% 甲酸的甲醇，超聲波提取10 min，用含0. 5%甲酸的甲醇定容至刻度，經濾紙過濾，過0. 45 μm 濾膜，濾液供HPLC 分析。

1． 4 HPLC 條件

色譜柱: 資生堂CAPCELL PAK SCX 柱( 250mm × 4. 6 mm，5 μm) ; 柱溫: 30 ℃; 進樣量: 20 μL;檢測波長: 260 nm; 流動相: ( A) 乙腈和( B) 乙酸銨緩沖溶液( pH 4. 0) ; 梯度洗脫程序: 0 ～ 15 min，100%A 線性降至75% A; 15 ～ 20 min，75% A; 20～ 26 min，100%A。流速: 1. 0 mL /min。

1． 5 定性定量方法

采用標準物質的保留時間和峰掃描光譜純度對照兩種方式對樣品峰進行定性，以外標法定量。2 結果與討論

2． 1 樣品提取

為了充分提取樣品中的苯扎氯銨，本實驗首先分別選擇乙腈、甲醇、正己烷作為樣品提取溶液進行提取，但試驗結果均不理想( 加標回收率低于50%) 。考慮到苯扎氯銨為弱堿性化合物，經過反復試驗，發現含0. 5% 甲酸的甲醇能有效地提取樣品中苯扎氯銨( 平均加標回收率高于90%) ，因此選擇此溶液作為樣品提取液。此外，為了提高方法的檢出限，本實驗選擇將護發素等膏霜類樣品提取溶液旋轉蒸發富集后再進行色譜分析。

2． 2 HPLC 條件的優化

2． 2． 1 色譜柱的選擇

考慮到苯扎氯銨為季銨鹽類陽離子，而且化妝品中基質干擾較大，為了簡化樣品的前處理凈化步驟，本實驗選擇SCX 陽離子色譜柱作為本方法的色譜分析柱。

2． 2． 2 流動相的選擇

苯扎氯銨為弱堿性化合物，而且3 種苯扎氯銨同系物的性質極為相近，為了有利于色譜峰的分離及峰形的改善，本方法采用乙酸銨緩沖溶液( pH4. 0) 和乙腈為流動相，利用梯度洗脫的方法提高分離效果，測試開始時，流動相中乙酸銨緩沖溶液( pH4. 0) 與乙腈的比例為0∶ 100，然后在0 ～ 15 min 內將二者的比例調整為25∶ 75，通過上述梯度，可以較好地分離3 種苯扎氯銨同系物。

2． 2． 3 檢測波長的選擇

對苯扎氯銨標準溶液分別用紫外光譜儀進行掃描，發現其在215 nm 和260 nm 附近處有共同較大吸收峰，215 nm處響應值比260 nm 響應值高10 倍左右，但是215 nm 為紫外區域的極限，大多數化合物在此有強吸收，因此從色譜測定角度考慮，本方法選擇260 nm 為檢測波長。在上述優化的色譜條件下得到了令人滿意的結果( 見圖1) 。

2． 3 標準曲線、線性范圍和檢出限

將逐級稀釋的標準工作液( 5. 0、25. 0、100. 0、500. 0、1 000. 0、3 000. 0 mg /L) 分別進樣20 μL，以分析物的質量濃度x ( mg /L) 為橫坐標，峰面積y 為縱坐標進行線性回歸，在5. 0 ～ 3 000. 0 mg /L 范圍內得到的線性關系: C12-BAC，y = 0. 847x － 1. 635( r = 0. 999 9) ; C14-BAC，y = 0. 580x － 0. 569 ( r =0. 999 9) ; C16-BAC， y = 1. 218x + 0. 568 ( r =0. 999 9) 。同時進行樣品添加試驗，以信噪比( S /N) 為3 確定3 種苯扎氯銨同系物的檢出限，用空白樣品提取液進行實驗，在信噪比均大于3 的條件下，將此添加量定為檢出限。在空白樣品( 護發素) 中添加200 mg /kg 的3 種苯扎氯銨同系物混合標準溶液，按1. 3. 1 節方法處理后，經測定6 個平行樣品中3 種苯扎氯銨同系物的S /N 均大于10，平均回收率大于92%，相對標準偏差( RSD) 低于7%，因此將200 mg /kg 定為方法的定量限。

2． 4 回收率和精密度

每組準確稱取空白護發素類樣品6 份，每份0. 50 g，共3 組，分別定量加入C12-BAC、C14-BAC、C16-BAC 標準品，添加水平分別為200、400、1 000mg /kg，按1. 3. 1 節方法制備后進行測定，結果見表1。從表1 中可看出，不同濃度的平均加標回收率為92. 5%～ 102. 1%，平均RSD 為3. 81%～ 6. 66%( n =6) ，滿足實驗要求。

利用本方法對市場銷售的25 種各類化妝品進行檢測，其中2 種品牌的洗發水檢出C14-BAC，含量分別為317. 74 mg /kg 和222. 18 mg /kg，其他各類化妝品未檢出目標化合物。圖2 為其中一種陽性樣品的色譜圖。

結語

建立了化妝品中3 種苯扎氯銨同系物同時測定的HPLC 方法。通過對實驗條件進行選擇和優化，確定了色譜條件，在20 min內3 種苯扎氯銨同系物可達到*基線分離，而且能有效地排除基質中其他物質的干擾。方法的線性關系、回收率及精密度等各項參數表明，方法的靈敏度和準確度均滿足實際樣品檢測的需要。該方法的樣品前處理簡單易行，分析快速，對化妝品中3 種苯扎氯銨同系物能有效的提取、分離和測定，結果良好。