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液相色譜柱的柱壓不穩定怎么辦?

   2020年07月14日 16:13  
  【儀器網 解決方案】液相色譜儀的分離過程是在色譜分離柱中實現的,因此擔負分離作用的色譜柱就是色譜系統的心臟。色譜柱通常由柱管、壓帽、卡套(密封環)、篩板(濾片)、接頭以及螺絲等組成,在色譜柱的使用過程中,有一些需要十分注意的地方,色譜柱的柱壓就是其中之一。
 
  通常情況下,色譜柱柱壓與色譜圖峰形的好壞、柱效、分離效果以及保留時間等密切相關。柱壓穩定并不是指壓力值穩定于一個恒定值而是指壓力波動范圍在50 PSI(3.3 Bar)間(在使用梯度洗脫時,柱壓平穩緩慢的變化是允許的)。壓力過高過低都屬于柱壓問題。
 
  一、壓力過高:
 
  壓力過高是液相色譜儀使用中極為較為常見的問題,主要指壓力突然升高,一般是由于流路堵塞的原因。此時應分段進行檢查。
 
  1、斷開真空泵的入口處,此時PEEK管里充滿液體,使PEEK管低于溶劑瓶,查看液體是否自由滴下,如果液體不滴或緩慢滴下則是溶劑過濾頭堵塞。
 
  解決方法:用30%的硝酸浸泡半個小時用超純水沖洗干凈。如果液體自由滴下,則確定溶劑過濾頭正常。
 
  2、打開Purge閥使流動相不經過柱子,如果壓力沒有明顯下降,則屬于過濾白頭堵塞。
 
  解決方法:將過濾白頭取出,用10%的異丙醇超聲半個小時。如果壓力降至100 PSI(6.7 Bar)以下,證明過濾白頭正常。
 
  3、把色譜柱出口端取下,如果壓力不下降,則是柱子堵塞。
 
  解決方法:如果是緩沖鹽堵塞,則用95%的水沖至壓力正常。如果是一些強保留的物質導致堵塞,則要用比現在流動相更強的流動相沖至壓力正常。假如按上面的方法長時間沖洗壓力都不下降,則可考慮將柱子的進出口反過來接在儀器上,用流動相沖洗柱子。
 
  二、壓力過低:
 
  1、壓力過低的現象一般是由于系統泄漏
 
  解決方法:尋找各個接口處特別是色譜柱兩端的接口,把泄漏的地方旋緊。
 
  2、另一個原因就是泵里進了空氣,但此時表現的往往是壓力忽高忽低,更嚴重一點會導致泵無法吸上液體。
 
  解決方法:打開Purge閥,用3~5 ml/min的流速沖洗,如果不行,則要用針筒在排空閥處借住外力將氣泡吸出。

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