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液相色譜分離柱應該如何維護？

2020年07月13日 14:46

　　【儀器網維修保養】色譜技術是一種分離分析手段，液相色譜儀的分離是在色譜分離柱中實現的，因此擔負分離作用的色譜柱就是色譜系統的心臟。色譜柱通常由柱管、壓帽、卡套(密封環)、篩板(濾片)、接頭、螺絲等組成，如何保護好分離柱及減少柱的污染是延長色譜柱壽命的關鍵。

　　一、色譜柱的維護

　　1、加保護柱(預柱)。保護柱是根內裝填料與分離柱性質相近的短柱，接在分離柱前或代替流路過濾器。保護柱的作用是收集和阻塞分離柱口的化學垃圾，如果這些垃圾直接進入分離柱會逐漸堆積在柱頭，就會降低柱效能。

　　2、保護柱是消耗品，一般在分析50個樣品后需更換新柱芯。

　　3、避免高壓沖擊分離柱。一般色譜柱都能承受得起高壓，但經不住突然變化的高壓沖擊，會改變柱床體積，進而影響柱效。引起高壓沖擊的原因主要有：進樣器樣品閥轉動緩慢、泵啟動太快與柱切換等操作。

　　二、合理選擇分離柱

　　選擇色譜分離柱主要根據有兩點，一是根據待測組分的分子量大小；二是根據流動相條件，包括PH值、離子強度和溶劑極性等。

　　1、傳統硅膠基質的鍵合相柱要求流動相PH值在3-7之間，PH值(>8) 的流動相能溶解硅膠使鍵合相流失。所以一定要根據分析的對象、流動相的條件選擇合適的分離柱。

　　2、定期沖洗分離柱。每次分析工作結束時，沖洗完緩沖鹽后要過度到用強溶劑沖洗柱子，如色譜純甲醇等可以沖去吸附在柱上的強保留組分。

　　三、減少柱的污染

　　1、純化樣品。樣品純化的越干凈，分離柱的壽命就越長；反之只有提取沒有純化的樣品，分離柱柱效下降較快。

　　2、建立一套有效的色譜分析和樣品前處理方法、特別是在分析血漿和尿液樣品時，要特別注意樣品的提取與純化，盡量使處理過的樣品中雜質(如大分子蛋白、有機物等)降到低，以保護柱頭和柱子。

　　3、提取純化好的樣品應用流動相來溶解，一方面可以減少色譜圖中的溶劑峰干擾，另一方面也能夠檢查樣品在流動相中的溶解性，如果樣品進樣后在流動相中沉淀就會堵塞進樣器和柱頭，甚至樣品分解出現怪峰。如果出現樣品與流動相不溶要設法改變溶解條件，如更換樣品溶劑、改進樣品處理方法、過濾或者去除不溶性物質。

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