【中國儀器網 使用手冊】所謂電泳,是指帶電粒子在電場中的運動,不同物質由于所帶電荷及分子量的不同,因此在電場中運動速度不同,根據這一特征,應用電泳法便可以對不同物質進行定性或定量分析,或將一定混合物進行組份分析或單個組份提取制備,這在臨床檢驗或實驗研究中具有極其重要的意義。電泳儀正是基于上述原理設計制造的。下面簡單介紹其使用方法及注意事項。
一、如何使用電泳槽
夾芯式垂直電泳槽使用方法:
1、組成部件
(1)裝有鉑金絲的貯液槽一對,配有冷卻裝置及電泳緩沖液流出口。
(2)凹型橡膠框,配有玻璃板,可分別制作厚度為lmm、1.5mm的凝膠板,操作時根據需要選擇適當厚度的玻璃板及梳子配套使用。
(3)樣品孔模具(梳子)用于電泳加樣。
(4)固定貯液槽的螺絲桿及螺母4對,28D、30型為5對。
(5)橡膠管五根。兩根長的用于連接冷卻水的出入口;中等長度的兩根用于連接電極緩;中液的流出口;zui短的一根用于連接貯液槽間的冷卻水。
(6)導線1付。
2、使用方法
(1)清洗部件
上述部件組裝前要*清洗干凈。尤其是玻璃板及凹形帶槽橡膠框,必須用泡沫海綿沾少許肥皂粉或洗滌劑*清洗干凈。清洗后的玻璃板應放在玻璃板支架上晾干水后方能使用。
(2)組裝電泳槽
A、將四只固定螺桿插進一只貯液框(半上槽)的相應孔洞中,然后將貯液框仰放在桌上;
左手拿凹型槽橡膠模框,右手的拇指與中指握住玻璃板的兩側邊緣插到橡膠模框內 (注意手指不能接觸灌膠面的玻璃板);
將帶有玻璃的橡膠模框子放在仰放的貯液槽框架上,其下緣必須對齊貯液槽框下緣;
雙手拿另一只貯液槽框與仰放在桌上的貯液槽框相合,并使橡膠框上的凸出線位于貯液槽有機玻璃框中央;
裝上四只螺母,擰緊螺絲。注意擰緊螺絲時用力應均勻,用雙手按斜角位置雙雙逐漸擰緊;
將電泳槽垂直豎起,放在桌上,帶短玻璃板的貯液槽稱上槽(陰),帶長玻璃板的貯液槽稱為下槽(陽),在長玻璃板與橡膠框間有一縫隙。此縫隙可用已熔化的10%瓊脂沿長玻璃板下端灌入,為防止留存氣泡,可稍抬起一端即可趕去氣泡。待瓊脂*凝固后才能灌膠。
B、也可將槽垂直豎起,將帶有玻璃的橡膠模框直接放入槽中,對稱擰緊螺絲后,用瓊脂封底邊。
3、灌膠
(1)先灌分離膠,待凝固后再灌濃縮膠。灌膠前接通冷卻水,夾緊連接上下貯液槽的兩根橡膠管。
(2)用細頭滴管吸取膠液,沿長、短玻璃板中間縫隙從一端加入膠液。為防止產生氣泡,可稍拾起另一端(氣泡往高處走),不斷加入膠液。若單層膠(分離膠)則加膠量約距離短玻璃板上端0.3厘米處,輕輕加少許水,雙手輕輕將梳子插入,待膠凝后就可形成凹形加樣孔。
(3)為防止漏膠,在上、下貯液槽中立即加入蒸餾水,但蒸餾水不能超過短玻璃板上緣。
(4)膠凝固后即可看到樣品槽梳子與凝膠板間有一層折
射率不同的亮區。
4、加樣
(1)松開連接上、下貯液槽兩根橡皮管上的夾子,放掉槽內的蒸餾水,待水流完后,再夾緊夾子。
(2)雙手輕輕取出樣品梳子,即可看到界線清楚的加樣孔,將孔中水分吸去(注意千萬不要碰壞孔沿的字面)。
(3)在上、下貯液槽中加入緩;中液,液體高度應超過上貯液槽短玻璃板上緣。
(40用微量注射器吸取一定量的樣品加到長、短玻璃板間的凹型凝膠樣品孔內(注意加樣動作要輕,針頭不能碰壞膠面)。
5、電泳
一貯液槽導線與電泳儀的負極相連,下貯液槽導線與電泳儀的正極相連。檢查線路無誤,方可按照所要求的電壓電流進行電泳。
二、注意事項
1、電泳儀通電進入工作狀態后,禁止人體接觸電極、電泳物及其它可能帶電部分,也不能到電泳槽內取放東西,如需要應先斷電,以免觸電。同時要求儀器必須有良好接地端,以防漏電。
2、儀器通電后,不要臨時增加或撥除輸出導線插頭,以防短路現象發生,雖然儀器內部附設有保險絲,但短路現象仍有可能導致儀器損壞。
3、由于不同介質支持物的電阻值不同,電泳時所通過的電流量也不同,其泳動速度及泳至終點所需時間也不同,故不同介質支持物的電泳不要同時在同一電泳儀上進行。
4、在總電流不超過儀器額定電流時(zui大電流范圍),可以多槽關聯使用,但要注意不能超載,否則容易影響儀器壽命。
5、某些特殊情況下需檢查儀器電泳輸入情況時,允許在穩壓狀態下空載開機,但在穩流狀態下必須先接好負載再開機,否則電壓表指針將大幅度跳動,容易造成不必要的人為機器損壞。
6、使用過程中發現異常現象,如較大噪音、放電或異常氣味,須立即切斷電源,進行檢修,以免發生意外事故。
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