詳見線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅰ/NADH-CoQ還原酶活性檢測(cè)試劑盒說明書
線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅰ活性檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明:
復(fù)合體Ⅰ(EC 1.6.5.3)又稱 NADH-CoQ 還原酶或 NADH 脫氫酶,廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞的線粒體中,是線粒體內(nèi)膜中最大的蛋白復(fù)合物。該酶催化一對(duì)電子從 NADH 傳遞給 CoQ,同時(shí)可使 O2 還原生成 O2-,是呼吸電子傳遞鏈上產(chǎn)生 O2-的主要部位。測(cè)定該酶活性,不僅可以反映呼吸電子傳遞鏈(ETC)狀態(tài),而且可以反映活性氧(ROS)生成狀態(tài)。
復(fù)合體Ⅰ能夠催化 NADH 脫氫生成 NAD+,在 340nm 下測(cè)定 NADH 的氧化速率計(jì)算出該酶活性的大小。
注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇 2-3 個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
需自備的儀器和用品:紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/ 96 孔 UV 板、研缽/勻漿器、細(xì)胞超聲破碎儀、丙酮、冰和蒸餾水。
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