1 目的：為保證Alliance 2695型的正確使用，建立Alliance 2695型液相色譜儀標準操作規程。

2 范圍：適用于Alliance 2695型液相色譜儀操作的全部行為。 

3 責任：中心化驗室對本SOP的實施全面負責。 

4 內容： 

4．1 開機 

4．1．1接通儀器插座電源開關。 

4．1．2 先打開2695主機的電源開關，再打開2996檢測器的電源開關。 

4．1．3待2695主機與2996檢測器自檢完畢后，打開電腦顯示器、電腦主機電源開關，計算機開始自檢進入Windows 2000桌面。 

4．1．4在電腦屏幕上用鼠標雙擊Millennium32（M32）圖標。進入Waters高壓液相操作系統主窗口。成都雅源科技專業提供國產實驗設備，進口實驗設備（島津、安捷倫等）主要產品：、、、、、標準品、凈化工作臺、旋光儀、熔點儀、色譜純試劑、、酒色譜、柱溫箱、水分測定儀、分析天平、紫外可見分光光度計、離心機、旋轉蒸發儀、超聲波清洗機、定氮儀、氮吹儀、固相萃取儀、樣品瓶、折光儀、酸度計、電導率儀、農殘速測儀、生物安全柜、恒溫濕箱、真空干燥箱、藥物穩定性試驗箱、培養箱、、馬弗爐、原子吸收等。

4．1．5單擊M32主窗口上“Login”鍵，當出現User name提示時，輸入使用者代號，在Password提示里輸入此代號對應密碼 。再按回車鍵即可激活Millennium32操作窗口。 

4．2 硬件操作 

4．2．1溶劑脫氣 

先打開氦氣瓶氣體閥門，將分壓表調至0．5MPa；按“Menu/Status”鍵，進入“Status（1）”界面，用“↑”、“↓”、“←”、“→”鍵在界面上 “Sparge”項中，選擇A、B、C或D中所選用的溶劑流路號進行脫氣處理（如選用A、B兩瓶溶劑，則選擇A-100%，B-100%，按“Enter”鍵開始脫氣），脫氣15～20分鐘后，可將脫氣量由100%降為30%。 

4．2．2干灌注 

如長時間未用機器溶劑管理系統流路是干的或系統中有空氣存在時，需先做抽氣灌注處理。 

4．2．2．1輕輕振蕩溶劑瓶中的過濾頭以除去可能存留的氣泡； 

4．2．2．2打開溶劑輸送單元進入門，在灌注排液閥出口插上一支注射器，然后打開排液閥（逆時針旋轉半圈），不要將注射器固定在排液閥上，而要用手將其緊貼排液閥的出口； 

4．2．2．3按界面右下角“Direct Function”鍵進入子菜單，選擇“Dry prime”項，按“Enter”鍵，在“duration”項中輸入一數值（從5起），按屏幕上所需做灌注的流路號A、B、C或D鍵； 

4．2．2．4按“Continue”鍵，用一只手握住注射器，同時另一只手抽注射器的桿，使針筒中產生一段使流路中空氣逸出所必需的真空； 

4．2．2．5重復此操作直至排液口有溶劑流出。（這可能需要幾分鐘時間，特別是當在線脫氣機也同時在灌注時，時間會更長。） 

4．2．2．6此流路灌注完畢后，重復上述操作將4個溶劑通道都充滿溶劑，然后關閉排液閥。按“Cancel”鍵退出“Dry prime”程序。 

4．2．3 濕灌注 成都雅源科技專業提供國產實驗設備，進口實驗設備（島津、安捷倫等）主要產品：、、、、、標準品、凈化工作臺、旋光儀、熔點儀、色譜純試劑、、酒色譜、柱溫箱、水分測定儀、分析天平、紫外可見分光光度計、離心機、旋轉蒸發儀、超聲波清洗機、定氮儀、氮吹儀、固相萃取儀、樣品瓶、折光儀、酸度計、電導率儀、農殘速測儀、生物安全柜、恒溫濕箱、真空干燥箱、藥物穩定性試驗箱、培養箱、、馬弗爐、原子吸收等。在Status（1）界面上Composition項中A、B、C或D中選擇所需濕洗處理的溶劑流路號，輸入100%。（若選用兩種以上溶劑，則按實際流動相溶劑配比分別輸入各自百分比。如A-60%,B-40%）按界面右下角“Direct Function”鍵，在Direct Functions子菜單中選擇“Wet prime”項，按“Enter”鍵,用箭頭和數字鍵編輯流速及時間參數，按“OK”鍵，機器開始濕灌注操作。重復上述操作，直至所有需用溶劑流路均濕灌注完畢。按“Cancel”鍵退出“Wet prime”程序。 

4．2．4沖洗進樣器 

按界面右下角“Direct Function”鍵，在Direct Functions子菜單中選擇“Purge Injector”項，按“Enter”鍵, 用箭頭和數字鍵編輯相關參數，按“OK”鍵，機器開始沖洗進樣器。完畢后按“Cancel”鍵退出“Purge Injector”程序。 （生物秀儀器頻道 ）

4．2．5清洗進樣針 

按“Menu/status”鍵切換到開機主界面，按“Diag”鍵，在診斷界面中按“Prime NdlWsh”鍵，按“Start”鍵，開始清洗進樣針。完畢后按“Cancel”鍵退出“Prime NdlWsh”程序。 

4．2．6流路排氣 

在診斷界面中按“Prime SealWsh”鍵，按“Start”鍵，開始灌注流路排出氣泡。肉眼觀察流路中沒有氣泡后，按“Halt”鍵停止灌注，按“Close”鍵退出“Prime SealWsh”程序。 

按“Exit”鍵退出診斷界面，“Menu/Status”回到“Status（1）”界面。 

4．3 軟件操作
4．3．1 建立方法
4．3．1．1 進入Project窗口
在M32主窗口選項中選擇所需的project，然后將Browse project打開，再按ok即可進入project窗口。
4．3．1．2 建立儀器方法
選擇file，點New method，再點Instrument Method儀器自檢后即可出現Instrument
Method Editor窗口，選擇2695以及2996的有關項目，填好后選file，點save as輸入儀器方法，按save，然后按Exit退出。
4．3．1．3 建立數據處理方法
選file,點processing Method即可出現processing Method Editor窗口，然后根據自己的要求在有關項目上填寫，填好后選file，選Save as，輸入處理方法名稱后選Save，zui后選Exit退出。
4．3．1．4 建立報告方法
選file，選Reporting Method即可出現Report publisher窗口，然后根據需要選擇Chromatograms、Sample information以及result table，zui后選save as，輸入報告方法名稱后選Exit退出。
4．3．1．5 建立儀器方法組
選擇file，點New Method，再點Method Set即可出現Method Set Edit的窗口，在Instrument Method空白處選剛建立的儀器方法；在Default processing Method處選擇剛建立的數據處理方法；在Default Report Method處選剛建立的報告方法，然后再選file，選Save as，輸入儀器方法組名稱，按Save，zui后選Exit退出成都雅源科技專業提供國產實驗設備，進口實驗設備（島津、安捷倫等）主要產品：、、、、、標準品、凈化工作臺、旋光儀、熔點儀、色譜純試劑、、酒色譜、柱溫箱、水分測定儀、分析天平、紫外可見分光光度計、離心機、旋轉蒸發儀、超聲波清洗機、定氮儀、氮吹儀、固相萃取儀、樣品瓶、折光儀、酸度計、電導率儀、農殘速測儀、生物安全柜、恒溫濕箱、真空干燥箱、藥物穩定性試驗箱、培養箱、、馬弗爐、原子吸收等
4．3．2 進樣
在Millennium32主窗口上選Run Samples，儀器即行自檢后進入Quick set窗口，點擊流速圖標，在所用流動相流路號A、B、C或D項中輸入所占百分比，并輸入流速和其他參數，點擊“OK”鍵，開始平衡系統（此步前應先用過濾水充分沖洗分析柱）。在Instrument Method處選自己需要的儀器方法，然后選Samples，填寫Sample Name、 Function、 Method set、 Vial、injection以及Run time，zui后按Monitor按鈕監測基線，等基線平穩后即可進樣。
4．3．3 數據處理與分析
結束后回到project窗口進行數據處理與分析，點channel，選擇所需要的sample Name、選擇review進入review窗口后即可處理與分析數據。
4．3．4 打印結果
先回到project窗口，然后打開打印機，準備好后點result處，選擇所要打印的Sample Name，再點print按鈕，出現打印窗口，選擇ok即可。
4．4 關機
先將分析柱用過濾水沖洗充分，然后用過濾水沖洗進樣器和進樣針各3次，在將系統用甲醇或乙腈等適當溶劑保護。zui后將流速分階段調至0，再將M32軟件分窗口全部關掉，按主窗口上“Logout”推出M32操作系統。回到Windows 2000窗口，退出Windows 2000后，關掉主機電源開關，再關掉顯示器，然后按順序關掉2996，2695電源開關。
4．5 維護與保養
4．5．1每次用前先用過濾水沖洗3～4個柱體積，再用流動相平衡；用后也要用過濾水沖洗2～3個柱體積，再用無水甲醇或無水乙腈保護。
4．5．2 打開控制泵后，要注意A、B、C、D四閥門是否停留在自己所需要的位置，各管吸頭是否浸沒在流動相液面下。
4．5．3啟動泵之前，千萬要注意先抽濾，使流動相充滿所需要的各管，然后再調節流速。
4．5．4隨時注意壓力變化情況，如果壓力變化較大，則說明有氣泡進入了分析柱要及時排掉，否則影響分析結果。
4．5．5 檢測器暫不用時要將紫外燈關掉，以延長其使用壽命。
4．5．6 關機前要用過濾水沖洗進樣器和進樣針各3次。以免殘余物質腐蝕機器，影響下一次使用。

氮吹儀  固相萃取儀  抑菌圈測定儀        化學試劑  色譜柱  純水機        

來源成都雅源科技