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文獻名：淀粉基納米顆粒的制備及其與納豆激酶的作用機理研究

作者：黃銀娟（蘭州大學， 高分子化學與物理， 2013， 碩士）

導師：柳明珠 

摘要：由于具有來源廣、生物相容、可生物降解及易被修飾等優(yōu)點,淀粉被廣泛應用于生物醫(yī)學、食品添加劑及可生物降解復合材料等領域。然而若要作為藥物載體,原淀粉大的尺寸和小的比表面積導致較低的載藥量；若作為可注射藥物載體,大的尺寸還會引起較大的毒副作用,因而其應用受到限制。近年來,可生物降解的淀粉納米晶和納米粒的制備及其應用越來越引起廣大研究者的興趣。本論文以可溶性淀粉為原料,采用反相微乳液法制備淀粉納米粒,研究淀粉納米粒的降解性、生物相容性以及與納豆激酶(NK)的作用機理,并對負載NK的陰離子型淀粉納米粒的體外溶栓性能進行了初步研究。具體包括以下幾方面的內容：(1)分別以N,N-亞甲基雙丙烯酰胺(MBA)和雙丙烯酰胱胺(BACy)為交聯(lián)劑,采用反相微乳液交聯(lián)法,制備了超小型淀粉納米顆粒(Non-NPs)。考察了反應條件如淀粉用量、表面活性劑種類及用量和油水比(O/W)對產(chǎn)物粒徑的影響,得到制備小粒徑Non-NPs的*條件：淀粉用量為0.2g,山梨糖醇酐油酸酯(Span80)用量為1.0g,油水比為7：1,交聯(lián)劑量為40%(占淀粉葡糖單元的摩爾分數(shù)),反應溫度為55℃,反應時間為4h。通過傅里葉變換紅外(FTIR)分光光度計、核磁共振氫譜(1HNMR)及透射電子顯微鏡(TEM)對產(chǎn)物進行了表征；采用凝膠滲透色譜(GPC)考察了產(chǎn)物的體外降解行為；通過熒光光譜法研究了Non-NPs與NK的作用機理。研究發(fā)現(xiàn),Non-NPs對NK的熒光強度有靜態(tài)猝滅作用,升高溫度使得二者結合常數(shù)減小；產(chǎn)物無明顯細胞毒性；BACy交聯(lián)淀粉顆粒(BACy-NPs)降解速率快于MBA交聯(lián)淀粉粒(MBA-NPs).結果表明,Non-NPs與NK通過氫鍵和范德華力相互作用；二硫鍵的引入可提高交聯(lián)粒子的降解性能。(2)以三氯氧磷(POCl3)為交聯(lián)劑,以醚化的可溶性陽離子淀粉為原料,采用反相微乳液交聯(lián)法,制備了陽離子型淀粉納米顆粒(Cat-NPs)。通過條件優(yōu)化得到制備超小型Cat-NPs的*條件：淀粉用量為0.5g,Span80用量為0.5g，O/W為10：1,交聯(lián)劑量為30μL,反應溫度為30℃,反應時間為4h。通過FTIR、1HNMR及TEM對產(chǎn)物進行了表征；采用3,5-二硝基水楊酸比色法(DNS法)考察了Cat-NPs的體外降解行為；通過熒光光譜法研究了Cat-NPs與NK的作用機理。研究發(fā)現(xiàn),Cat-NPs對NK的熒光強度有增強作用,Cat-NPs與NK結合常數(shù)隨溫度升高而減小；Cat-NPs無明顯細胞毒性,且降解速率較快。結果表明,氫鍵和范德華力是Cat-NPs與NK間的主要作用；Cat-NPs有良好的生物相容性和降解性。(3)以POCl3為交聯(lián)劑,采用反相微乳液交聯(lián)法,制備了陰離子型淀粉納米顆粒(Ani-NPs)。考察了反應條件對產(chǎn)物粒徑的影響,得到制備超小尺寸Ani-NPs的*條件：淀粉用量為0.5g,Span80用量為1.0g,O/W為10：1,交聯(lián)劑量為30μL,反應溫度為30℃,反應時間為4h。通過FTIR、掃描電子顯微鏡(SEM)及TEM對產(chǎn)物進行了表征；采用DNS法考察了Ani-NPs的體外降解行為；通過熒光光譜法研究了Ani-NPs與NK的作用機理；并通過稱重法考察了負載NK的Ani-NPs的體外溶栓性能。研究發(fā)現(xiàn),Ani-NPs對NK的熒光強度有增強作用,Ani-NPs與NK結合常數(shù)隨溫度升高而減小；Ani-NPs有較好的細胞相容性和體外降解性能。結果表明,二者之間以靜電吸引和氫鍵作用為主；Ani-NPs對NK具有保護和控制釋放的作用,可作為NK的潛在載體。

關鍵詞：淀粉納米顆粒； 納豆激酶； 熒光光譜法； 作用機理； 體外溶栓；