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技術文章
飼料中免疫球蛋白IgG的測定液相色譜法
點擊次數:587 發布時間:2014-12-1
本標準規定了用液相色譜儀測定飼料中免疫球蛋白IgG含量的方法。本標準適用于配合飼料、濃縮飼料、含IgG的飼料原料(包括血漿等)中免疫球蛋白IgG的測定。zui低檢出限為5μg(取樣1g,zui低檢出濃度為5mg/kg)。
原理:飼料中免疫球蛋白IgG的測定液相色譜法是根據親和色譜的原理,在磷酸鹽緩沖鹽條件下免疫球蛋白IgG與配基相連,在PH2.5的鹽酸*條件下洗脫免疫球蛋白IgG。
試劑:
磷酸二氫鉀 ,*, IgG標準液,流動相A(PH6.5,0.05mol/l磷酸鹽緩沖液),流動相B(PH2.5,0.05mol/l*鹽酸緩沖液),
儀器:
液相色譜儀(具紫外檢測器和梯度洗脫裝置). 色譜工作站, 進樣閥,實驗室常用儀器設備,PH計 ,勻漿機 ,超純水裝置。
色譜條件:
色譜柱:Pharmacia HI-Trap Protein G柱,1ml
波長:280nm
進樣量:20ul
流動相:流動相A=PH6.5 0.05mol/l磷酸鹽緩沖液 流動相B=PH2.5 0.05mol/min*鹽緩沖液
時間 流速ml/min 流動相A% 流動相B%
0-4.5 0.5 100 0
4.5-15.0 0.5 0 100
15.0-26.0 0.5 100 0