液相色譜儀作為一種分離技術和方法，目前已經發展到一個全新的階段。高精度的輸液泵，應用廣泛的色譜分離柱，低噪音、高靈敏度的各種檢測器和功能強大的數據處理軟件系統的出現，都推動了液相色譜技術的迅猛發展。液相色譜儀正以它分辨率高、分析速度快和應用廣泛的優點倍受儀器分析工作者的青睞，廣泛地應用于醫藥衛生、環境監測、食品檢測等領域。
應用HPLC技術在血藥濃度、生物胺、核苷酸、蛋白質濃度測定等實際工作中，積累了許多的方法和經驗，在這里與大家交流，希望能對同行們有所幫助和借鑒，共同促進液相色譜分析技術的發展。
液相色譜儀使用過程中常見問題分析
?。ㄒ唬┲鶋簡栴}
柱壓過高，導致這種情況的直接原因可能是色譜分離柱或進樣器流動不暢通。出現這種情況的根本原因可能是流動相抽濾不干凈，存有雜質，從而堆積在色譜柱或過濾器中，這時只要重新配置一遍流動相。解決“堵”的方法就是檢查色譜分離柱，確定其流動是否暢通，具體操作是在泵工作的情況下將色譜柱的出口處擰開，看看是否有流動相流出，同時可以調節流速，觀察流動相流出的流量，進而判斷色譜柱是否堵了。還有一些原因，比如：流動相的流速過大（一般為1.0ml/min）、流動相的成分不符合標準（沒有使用HPLC級別的試劑或者沒有超聲*）等。這些按照藥典調整成正確的設置即可。如果懷疑是在線過濾器堵了可以關閉排液閥，斷開出口管路，設定流速為1ml/min，如壓力>3kgf/cm2，則可能堵塞，可以考慮將其置于5%稀硝酸，超聲波清洗一段時間。zui后在檢測驗樣品的時候加一個保護柱。有時候也會柱壓過低，發生這個原因主要是連接不牢固，導致漏液，擰緊即可。更換流動相時沒有進行脫氣，導致儀器里面進入空氣，一般的解決方法就是卸下超聲清洗，然后進行脫氣。
?。ǘ┗€漂移
在色譜儀啟動之前，通常先啟動半個小時后再進行操作，這樣做是避免基線漂移。出現這種現象的原因很多，其一是色譜柱溫差變化大，需要控制柱溫，用色譜純，也可多抽濾幾次，除去醇溶性流動相外的其他流動相要勤更換，做到現配現用，以免滋生微生物，堵塞進樣通道，造成基線不穩定，影響出峰。第三個原因是流路本身長期進樣沒有時間保養積淀的雜質。解決方法是用洗脫劑沖洗樣品流動的通道，對于反相色譜系統的流動相甲醇-水系統，按照梯度洗脫的方法沖洗掉系統和色譜柱中的雜質，以免影響樣品的質量。必要時可以用異丙醇。第四個可能性就是由于紫外燈的使用壽命到了，不能再繼續工作，解決方法是換紫外燈。zui后是樣品本身性質的影響，對于流動相的影響較大，解決方法就是用保護柱檢測樣品，以免出現問題。
想了解更多液相色譜儀信息歡迎客服
10
立即詢價
您提交后，專屬客服將第一時間為您服務