如何減少液相色譜的基線噪音

點擊次數：553 發布時間：2014-11-30

     在液相色譜儀的操作過程中，經常會產生一些基線噪音，如何在使用過程中來避免這些噪音的產生，在本文中會為大家做一詳細介紹。

1.流動相的在線混合
      所有的流動相在線混合都是從方便出發的結果，流動相混合的不充分是基線噪音的一個重要
來源。混合方式主要有兩種：
a．低壓混合：采取時間脈沖的方式，利用比例閥，將不同流動相按一定比例混合。 
b．高壓混合：利用多個泵，控制每個泵的流量，將不同的流動相按一定比例混合。
在流動相混合后，一般都有一個混合器（Mixer）來幫助混合，使之更加充分。從流動相開始
混合在一起，到流動相到達色譜柱頭，這一段體積叫做延遲體積（Delay Volume）。Mixer體積
越大，混合越好，但是相應延遲體積就越大，造成梯度的延遲。換句話說，就是流動相的變化，
需要一定時間后，才能真正到達色譜柱，對分離產生影響。這個現象在使用UPLC或者UHPLC
的時候，會有比較明顯的作用。

      為什么相同梯度方法，在不同儀器，或者不同品牌的儀器之間轉化時，保留時間可能不一樣？
       其主要原因就是延遲體積的不同。
       在線混合很難做到非常均一的混合效果，這個在示差檢測器（RID）上的效果zui明顯。這也
是為什么示差檢測器都要求將流動相預混到一個瓶子里，不能走梯度的原因。
        那如何減小因為混合而造成的基線噪音呢？

a.對于等度的方法，非常簡單，預混流動相就可以了。
b．對于梯度的方法，部分預混流動相也會幫助更好的混合，怎么做呢？看下面的例子。
方法要求乙腈/水比例從10%走到85%。 那可以將流動相A配成10%的乙腈，流動相B
配成85%的乙腈，然后A/B梯度從0%走到100%。 這就是部分預混。

c．增大Mixer的體積。一般mixer的體積從幾百ul到幾個ml都有，在允許的延遲時間下，
更換一個體積更大的Mixer，能夠有效提高混合的效率。每個色譜生產廠家的Mixer體積都不一樣，基本都可以混用。
 

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